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卵巢癌3D類器官培養基

簡要描述:卵巢癌3D類器官培養基(Ovarian Carcinoma Organoid Medium)是一種為促進人源卵巢癌類器官體外形成和擴增而開發的培養基。

  • 產品型號:型號齊全
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-12-17
  • 訪  問  量:1334
詳情介紹

產品名稱卵巢癌3D類器官培養基Ovarian Carcinoma Organoid Medium)
產品說明卵巢癌3D類器官培養基Ovarian Carcinoma Organoid Medium)是一種為促進人源卵巢癌類器官體外形成和擴增而開發的培養基。它是一種無菌的液體混合系統,含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質等。該培養基的*配方可以提供一個理想人源卵巢癌類器官體外培養環境,選擇性地促進體外人源卵巢癌類器官的生長。

產品優勢
(1) 培養成功率高

(2) 體外持續擴增

(3) 保持腫瘤特征

(4) 藥敏結果與臨床數據接近

使用說明:
?實驗前準備
1)15mL無菌離心管、1.5mL離心管、24孔細胞培養板、移液器、移液管、無菌槍頭等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30min。
2)提前30min從4℃冰箱取出卵巢癌類器官培養基平衡至室溫,提前1h從-20℃冰箱取出所需體積的基質膠冰上融化。
?卵巢癌類器官培養
1)將獲取的卵巢癌原代細胞懸液計數,根據計算好的體積吸取細胞懸液加入預冷的1.5mL離心管中。
2)補齊預冷的卵巢癌類器官培養基至所需體積,將預冷后的細胞懸液加入等體積的基質膠中輕輕混勻(全程冰上操作),使得卵巢癌原代細胞終濃度為5×106個細胞/毫升。
3)然后將細胞與基質膠的混合液按照50μL/孔呈半球形點膠于24孔板。
4)將培養板放入5%CO2、37℃培養箱終至少30min,待基質膠*凝固。沿孔壁每孔緩慢加入500μL預先恢復至室溫的類器官培養基,置5%CO2、37℃培養箱培養。
5)3天后鏡下觀察類器官形成情況,粒徑大于30~50μm即認為類器官已經形成,每5天更換一次培養基進行培養,持續觀察類器官大小,鏡下觀察大部分類器官大小均大于30~50μm目大小不再增大即可收集類器官進行后續實驗。
?卵巢癌類器官收集
1)棄培養基,每孔加入200μL基質膠解離試劑,室溫放置1min。

2)輕輕吹打混勻,收集至15mL離心管中,50rpm恒溫震蕩解離10-20min,解離之后1500rpm離心3 min,輕輕吸去上清,待用。
?卵巢癌類器官傳代
1)收集的類器官,加入適量的消化酶,37℃,200rpm消化(具體時間根據類器官大小和數量決定,以肉眼可見顆粒明顯減小一半為準,可中間取消化的類器官顯微鏡觀察,類器官消化至3~10個細胞集合體理想)。

2)消化*后1500rpm離心3min,棄上清,使用清洗液重懸后1500rpm離心3min。
3)加入預冷的卵巢癌類器官培養基進行重懸,計數,按照培養步驟操作繼續培養。
注意事項:
1.本產品在使用前需平衡至室溫。
2.樣本需為腫瘤組織,且腫瘤細胞比例越高(>50%),類器官培養成功率越高。3.使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
4.類器官培養過程要輕柔,避免基質膠凝固后散膠。
5.為保持本產品的理想使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。6.請于保質期內使用本產品,超出保質期,必須放棄使用。
7.本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。



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